島津色譜柱的選購指南詳解:
一、明確色譜柱類型:
1.按分離模式選擇
正相色譜(NPC):固定相為極性填料(如硅膠),適用于極性化合物分離(如油脂、藥物中間體)。
反相色譜(RPC):固定相為非極性填料,適用于非極性或弱極性化合物(如多環(huán)芳烴、生物大分子)。
離子交換色譜(IEC):用于帶電分子分離(如蛋白質(zhì)、氨基酸),可選強(qiáng)酸性(磺酸基)或強(qiáng)堿性(季銨基)交換柱。
體積排阻色譜(SEC):基于分子大小分離(如蛋白質(zhì)、多糖),填料為多孔硅膠或凝膠。
手性色譜(Chiral HPLC):專用于對映體分離,填料為環(huán)糊精、纖維素衍生物等。
2.特殊應(yīng)用型色譜柱
寬孔徑柱(Wide Bore):內(nèi)徑較大,適合制備色譜或低流速分析。
窄孔徑柱(Narrow Bore):內(nèi)徑較小,適用于高靈敏度檢測或微量樣品分析。
快速分離柱(Fast Chromatography):短柱或超細(xì)顆粒填料,縮短分析時間。
1.確定分離目標(biāo)
樣品類型(極性、分子量、濃度)?
需要高分辨率還是高通量?
2.匹配儀器性能
儀器耐壓:亞2μm柱需UHPLC系統(tǒng)。
檢測器兼容性:熒光/質(zhì)譜檢測需低熒光背景柱。
3.參考流動相條件
反相色譜:甲醇/水或乙腈/水(緩沖鹽調(diào)節(jié)pH);
正相色譜:正己烷/異丙醇。
4.驗證柱性能
測試標(biāo)準(zhǔn)品分離度;
對比不同品牌柱的塔板數(shù)、對稱因子。
三、島津色譜柱維護(hù)與壽命延長:
1.儲存條件
反相柱:保存在甲醇/水中(避免純水導(dǎo)致填料塌陷);
正相柱:保存在正己烷中(防止吸潮)。
2.清洗步驟
反相柱:依次用甲醇、水、甲醇沖洗,去除殘留鹽或蛋白質(zhì);
離子交換柱:用高濃度鹽溶液再生,再用水平衡。
3.避免損傷
禁止干涸填料(始終浸泡在流動相中);
樣品需過濾,防止顆粒堵塞柱床。
